常PCR实验室没有严格的净化要求,需根据实验内容确定实验室洁净度。当PCR实验样品需要保护时,实验室应设洁净空调系统。对于2019-nCoV核酸检测实验室,建议设置10万级净化。
气流组织宜采用上送下排,送风口和排风口布置应使室内气流停滞的空间降低到程度。
在生物安全柜操作面或其他有气溶胶操作地点的上方附件不得设送风口
过滤器排风口应设在室内被污染风险的区域,PCR核酸检测实验室净化施工,单向布置,不得有障碍;
不能以回(排)风夹墙代替排风直管,排风过滤装置与排风总管的连接必须全部是实体风管。
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PCR实验室规划设计需关注的要点
3.1 全新风空调系统模式
3.1.1 空调形式
PCR负压实验室净化空调系统采用全新风恒温恒湿净化空调机组+送风口的空调系统形式。
3.1.2 送风系统
新风经过恒温恒湿净化空调机组进行热湿处理、过滤处理(初效(G4)、中效(F9)、(H14))之后,送至洁净房间送风口,后送至洁净房间,达到排除室内热、湿负荷的效果并且保证送入室内的为洁净空气。每个实验区域及相关辅房的气流组织均为上送风、下排风。
为避免提取的核酸在柜内反复循环,造成标本之间的交叉污染,出现假阳性结果,PCR核酸检测实验室净化方案,该区域配备的生物安全柜必须是B2型的。生物安全柜工作区垂直气流全部来自实验室,排风经过过滤器(www.rfilter.com)过滤后直接排至室外,不允许回到安全柜和实验室中。
根据经验,商丘PCR核酸检测实验室净化,如果实验室内配备生物安全柜,每配备一台,PCR核酸检测实验室净化公司,实验室的面积增加10m2;标本制备区的面积宜在25m2~30m2之间。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。
扩增室该区域主要进行的操作为DNA或cDNA扩增。此外,已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。
在巢式PCR测定中,通常在轮扩增后必须打开反应管,因此巢式扩增有较高的污染危险性,第二次加样必须在本区内进行。
扩增室主要配备PCR实验室的核心仪器PCR仪,本文实例中使用了ABI7500和ABI9700两种PCR仪。
在实验室建造过程中,需要给PCR仪配备专门的UPS电源,以保证其正常工作。该区面积控制在15m2~20m2。
本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。建议采用5~10Pa压差,在控制上比较容易实现。